我们现提供的冻存管，为第二代菌之种。菌之种传代前应准备好适于该菌之种生长的液体、固体培养基和培养设备，所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。取一支冻存管于室温下自然解冻，取适量接种于液体培养基，或划线接种于固体培养基中按规定培养、传代。注意：已经解冻的冻存管应在24 小时内使用，不能再冷冻保存，以免冻融！

应用领域——生物学方向细胞冻存技术是生物学保存物种的重要手段。在环境遭到未有过的破坏动物、植被随时可能面临灭l绝危险的今天，更是尤为关键，虽然不是治本的方法，但至少可以尽可能的留下那些曾经存在的生命痕迹。

发展历史：1. 1776年, Spallanzani尤早发表了“冷”处理对“细胞”生命活动影响的报道。2.十九世纪中后叶，许多早期的工作者(Prevost, 1840; de Quatrefages, 1853; Mantegazza, 1866; Scheuk, 1870) 重复研究了低温处理对精l子活动的影响，得出了和SpalLanzani相似的结论。即“冷不能杀l死精l子”。

液氮法主要操作步骤为：(1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天尤好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用025%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分敞的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于高心管中离心(1000r/min, 10 分钟)。